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酶标仪(Microplate Reader)是对酶联检测(EIA)实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联反应是通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的,反应结果以颜色显示,通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。
酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。
光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本。该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号。电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果。
微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程。而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单。
微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀一致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液。其常见规格有40孔板,55孔板,96孔板等多种,不同的仪器选用不同规格的孔板,对其可进行一孔一孔的检测或一排一排的检测。
酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得,也可用分光光度计相同的单色器来得到。在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样,滤光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,其效果是相同的。光源灯发出的光经聚光镜,光栅后到达反射镜,经反射镜作90°反射后垂直通过比色溶液,然后再经滤光片送到光电管。
酶标仪有单通道和多通道两种类型,单通道又分为自动型和手动型两种。其中,自动型的仪器设有X和Y两个方向的驱动机构,在机械装置的驱动下,微孔板上的小孔一个个依次进入光束下面测试。手动型靠手移动微孔板来进行测量。
在单通道酶标仪的基础上,又发展了多通道、全自动型酶标仪。多通道酶标仪一般都是自动型的,它设有多个光束和多个光电检测器。如8通道的仪器,设有8条光束(或8个光源)、8个检测器和8个放大器。在机械驱动装置的作用下,样品被8个一排、8个一排检测。多通道酶标仪的检测速度快,但其结构比较复杂,价格也较贵,多用于大中型医院。
酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,特别在近几年中,由于大量的酶联检测试剂盒的应用,使得酶标仪在繁殖保健领域中应用越来越广泛,同时促进了繁殖健康技术水平提高。目前在国内血站临床试验室中酶标仪成为ELISA测定的重要工具。在农业中利用酶标仪研究酚氧化酶,为开发以该酶为靶标的新型害虫控制剂提供理论依据。伏马菌素是最近发现的一族主要由几种真菌产生的结构相关的毒素代谢产物,该毒素已被世界卫生组织列为近年来首先进行研究的几种霉菌毒素之一。因此快速、高效的检测伏马菌素便显得尤为重要。在450nm或630nm的滤镜下使用酶标仪对微孔板进行光学测量,可以检测伏马菌素的含量,在食品安全方面有着重要的应用。生长曲线一般指菌落总数CFU/mI?;蛘呔渥苁亩允齦og CFU/ml。随时间变化曲线,可用来展示微生物生长情况和新陈代谢规律。目前通过分光光度计测定菌悬液时存在即时性差、操作繁琐、易污染等缺点,由于酶标仪是一种快速、准确、高通量的仪器,所以我们总会选择使用酶标仪来进行菌悬液OD值的测定,来提高工作效率,节约时间。
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