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PCR篇-耗材选择
发布日期:2022/10/18 9:56:38
PCR 耗材为什么一般都是PP材质的呢?
因为PCR/qPCR耗材通?;嵊胧约粱蜓分苯咏哟?,而聚丙烯(PP)材质是生物学惰性材料,表面不易于粘附生物分子,且有着良好的化学耐性,及温度耐受性(可以121℃ 高压灭菌,也可以承受热循环过程中的温度变化)。
不同体积的PCR管/板,我该怎么选呢?
选择宗旨:依据具体的实验要求选用合适的产品。PCR管的体积大多数都可以满足PCR反应的要求。在此基础上,推荐优先选用低容管。因为低容反应管/板有着较小的上方空间,可提高热传导率并降低蒸发。同时,在加样时需要避免加样过量或过少。过量会导致热传导率下降,溢出及交叉污染,而过少可能会造成样品蒸发损失。
常见反应管的规格及体积:
单管/联管:0.5mL,0.2mL,0.15mL
96孔板:0.2mL,0.15mL
384孔板:0.04mL

样品量较少时,我会选单管或者联管,但是为什么有的是平盖,有的是凸盖呢?

当样品量较少时,都会优先选用单管或者联管。但是当反应体积需求较大时,单管占优势,体积可达0.5mL。而平盖和凸盖各有优点,具体可参考下面的信息。

不同颜色的PCR管/板,我该怎么选呢?
对于普通的PCR反应选用透明或者彩色的PCR管都是可以的,而彩色透明的PCR管更有助于进行样品分类管理。
但qPCR更推荐选用优质的白色PCR耗材。由于qPCR需要实时定量检测荧光信号强度,更需要灵敏、精确的荧光信号传递。实验证明,与传统的透明PCR产品相比,白色PCR产品可最大程度地反射荧光信号,减少孔间信号交叉污染,可优化实时荧光定量PCR的结果。

我之前买的PCR板/管材质厚度不一,是不是厚点的稳定性更好呢?
不是的,管壁厚度会直接影响热传导率,极薄的壁厚可优化热传递减少循环时间。要想提升PCR反应效率,保证反应稳定高效进行,均一、超壁薄的PCR耗材才是不二之选。
对于96孔或者384孔板,为什么有的有裙边,有的没有呢?
其实PCR/qPCR板的裙边是为了更好地适应自动化应用,可为仪器提供稳定的支持和机械耐受强度,且移液过程中的稳定性也会更高。
PCR板一般分为无裙边、半裙边、全裙边。
无裙边板:可适用于大多数的PCR仪或qPCR仪,但不适用于自动化应用。移液过程中稳定性不高,需要配合板托使用。
半裙边板:可适配标签或应用条码,及自动化应用,且有着较好的移液稳定性。
全裙边板:非常适用于自动化实验应用,也可适配标签及应用条码。机械强度较好,可适用于凸出模块的PCR仪,且移液过程中稳定性高。
对于96孔或者384孔板,为什么切角和标识都不是很相同呢?
这是由切角和标识的作用决定的。
切角:PCR板的切角位置选择取决于适配仪器要求,便于定位。

标识:PCR板的数字字母标记有助于识别单个孔及样品位置。一般为凸出的颜色数字标识或者印刻标识。对于一些自动化应用实验,印刻标记的反应板密封性会更好。

为什么有的PCR板孔是凸出的,有的却是平的呢,哪个更好?
适合的才是最好的。常见的PCR板有平孔缘和加高孔缘两种。
平孔缘的反应板,可适用于大多数的PCR仪。
升孔缘的反应板,便于封膜,可降低样品间的交叉污染风险。

PCR封板膜有好多种类型,哪种实验效果更好呢?
根据具体的PCR实验要求选用适配的高质量封板膜,不仅能有效地?;ぱ?,防止污染,还可以提供可信赖的实验检测数据。

提供温度耐受性和密封性强、高透明度、操作简便的高质量PCR/qPCR膜。

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